信任展开过维生素检测的小火伴们,已休会到了微生物法检测维生素的“难”了。尝试中老是呈现诸多题目——活化菌株不胜利,规范曲线非常,检测成果收受接管率偏高或偏低,反复性差等。为什么此种体例如斯难做,国标还将叶酸、B12、生物素、泛酸的微生物检测体例作为首选体例和仲裁体例呢?
微生物法根据菌株必须依靠特定维生素能力成长的道理,操纵比浊法测定细菌滋生水平或代谢产物,间接对该维生素停止定量测定。该体例特同性强,活络度高,也是国际上普遍操纵的体例。微生物法检测的是具备生物活性能够被接收操纵的维生素总量,这是仪器阐发体例很难做到的。
“难”在那里呢?是不是有处置体例呢?
鼠李糖乳杆菌ATCC7469、动物乳杆菌ATCC8014、莱士曼氏乳杆菌ATCC7830,这三株菌中当属莱士曼氏乳杆菌最为娇贵,常有活化失利的案例产生。倡议大师采办此菌后,第一次活化时需严酷根据ATCC申明书上体例先接种于MRS肉汤中35℃,有氧培育48h,以后转种血平板于35℃,厌氧培育48h,方可活化胜利。另外,每次做微生物法检测维生素尝试前,需提早用一周时候来活化储蓄菌种,持续传种2代~3代规复细菌活气后,方可操纵。接种液的制备因名目差别而处置体例差别,笔者不再赘述,只夸大一点:体例中只给出大抵菌液浓度规模即“透光率60%~80%之间”,详细调成几多浓度,还需尝试者根据菌株状况和尝试经历停止制备。
此产物真空包装,菌浓度定量制备且合适国标请求,间接插手培育基中便可操纵,既可保障菌株活性又可免除活菌、洗菌、调菌浓度等烦琐操纵,便利、简略、切确!同时,我司还供给了规范菌株的来历申明,可存档溯源。
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今朝规范中,请求规范品的纯度须要≥99%。凡是采办到的规范品纯度都不够,是以须要折算后停止称量,详细算法为:
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称量后根据国标请求慢慢浓缩,顺次配制规范储蓄液、中间液和任务液。配制时,须要注重——以下几点:
规范品切确称量,应操纵充足精度的天平停止规范品的称量;
差别维生素品种操纵差别的消融液,消融需充实摇匀,每次定容都需非常精准;
操纵棕色容量瓶停止规范溶液的配制,应注重差别维生素品种的规范储蓄液、中间液和任务液的保管前提及效期;
国标划定配制操纵的水为二级水,所用的试剂比方NaOH、乙醇等为阐发纯或更高级别。
规范溶液的配制进程庞杂、步骤较多、对操纵职员的手艺水平请求比拟高,配制的切确与否会间接影响检测成果的切确性,致使收受接管率偏高或偏低的环境产生。
我司推出冻干定量规范品,只要操纵无菌水复溶,充实震动混匀,便可操纵。一“键”操纵便可免除大师停止规范品称量、配制、浓缩、保管等庞杂的任务。同时我司还供给了规范品来历申明,可溯源,请安心操纵。
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制备维生素测定培育基,三角瓶需公用,不可与配制其余培育基的三角瓶混用,不然易混入方针维生素的成份;
培育基配制用水,必须操纵GB/T6682划定的二级水;
维生素测定培育基中,含有良多不耐热、易变性成份,高压灭菌时需注重不可过分加热。另外,灭菌后应实时将测定系列管从高压锅中拿出,放入冷水中疾速降温;
操纵烦琐,耗时。需先将培育基分装系列测试管,灭菌,再接种菌液,此操纵进程烦琐易净化,稍有不慎就会致使尝试失利。
即用型培育基,已灭菌处置,插手菌球混匀后,间接分装到系列尝试管中,只要“一步”便可实现接种操纵,替换国标中培育基灭菌和接种菌液的“两步”任务,处置上述“难”点的同时,大大节俭时候,前进任务效力。
维生素检测进程所涉及的一切器皿,包含容量瓶,吸管,三角瓶,试管,试管塞等均需处置,方可操纵。另外,倡议每一个名目器皿公用,不要混用,防止搅扰。
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维生素即用型产物,配套操纵无菌试管,防止试管,试管塞洗濯,酸泡,热处置的费事,极大水平的去除维生素检测的搅扰身分,前进任务效力的同时,保障成果的切确性。
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维生素即用型产物——可有效处置国标法检测尝试进程中的一切“难”点!削减职员操纵偏差,晋升尝试成果的切确性,并可极大水平的前进检测效力!
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